RESUMO
La hipótesis de trabajo es que el Mycobacterium leprae (M. leprae) viable desempeña un papel crucial en la precipitación de la reacción tipo 1 (T1R) en lepra. Materiales y métodos: Se estudiaron un total de 165 nuevos pacientes multibacilares. Para demostrar la presencia de M. leprae se emplearon tres técnicas en las lesiones en reacción T1R (+), como son el crecimiento en la almohadilla plantar (MFP), detección inmunohistoquímica de la proteína secretora M. leprae Ag85, y 16s rRNA - empleando RT-PCR in situ. Como controles, se emplearon biopsias de BEC y lesiones sin reacción T1R (-). Hallazgos: Un número significativamente mayor de homogeneizados de biopsia de lesión obtenidos al inicio, de casos T1R (+) han presentado crecimiento en MFP, demostrando la presencia de bacterias viables comparado con T1R (-) (P = 0·005). En contraste, pocas biopsias BEC resultaron positivas tanto en T1R (+) como en T1R (-). Con respecto a Ag85, mientras que la positividad total fue más elevada en T1R (+) (74%), la positividad de la tinción (Grado ≥ 2+) era significativamente mayor en el grupo T1R (+) BT-BB 11/20 (55%). En las muestras de biopsias en casos de T1R recurrentes, tanto el Ag 85 como el 16s rRNA, la positividad (62% y 100%) fue mayor en el grupo T1R (+). Se propone que las bacterias viables son componentes esenciales en las T1R y la diferencia en la calidad de los bacilos y no la cantidad o la ratio de inactivos/viables desempeña un papel en la precipitación de T1R. En conclusión, los hallazgos demuestran que los bacilos «metabólicamente activos» de M. leprae son un componente/requisito fundamental de la T1R y la proteína secretora Ag 85, quizás sea el precipitador de T1R (AU)
The working hypothesis is that, viable Mycobacterium leprae (M. leprae) play a crucial role in the precipitation of Type 1 reaction (T1R) in leprosy. Material and Methods: A total of 165 new multibacillary patients were studied. To demonstrate presence of viable M. leprae in reactional lesion (T1R+), three tests were used concurrently viz. growth in the mouse foot pad (MFP), immunohistochemical detection of M. leprae secretory protein Ag85, and 16s rRNA - using in situ RT- PCR. Mirror biopsies and non reactional lesions served as controls T1R (-). Findings: A significantly higher proportion of lesion biopsy homogenates obtained at onset, from T1R (+) cases have shown unequivocal growth in MFP, proving the presence of viable bacteria, as compared to T1R (-) (P , 0·005). In contrast, few Mirror biopsies were positive in both T1R (+) and T1R (-). With respect to Ag85, while the overall positivity was higher in T1R (+) (74%), however the intensity of staining (Grade ≥ 2+) was disproportionately higher in T1R (+) BT-BB lesions 11/20 (55%). In the rebiopsies obtained during a repeat episode of T1R, Ag 85 as well as 16s rRNA, positivity (62% & 100%) was higher in T1R (+). It is inferred therefore «viable» bacteria are an essential component in T1R and difference in the quality of bacilli, not the quantity or the ratio of dead to viable play a role in the precipitation of T1R. In conclusion, the findings show that «metabolically active» M. leprae is a component/prerequisite and the secretory protein Ag 85, might be the trigger for precipitation of T1R (AU)
